La inmunización con Clec9A-RBD puede desencadenar respuestas inmunitarias sistémicas y mucosas sólidas y sostenidas contra las variantes del SARS-CoV-2 que evolucionan rápidamente.

*Nota IMPORTANTE: bioRxiv Publica informes científicos preliminares que no han sido revisados ​​por pares y, por lo tanto, no deben considerarse concluyentes, orientar la práctica clínica o el comportamiento relacionado con la salud ni tratarse como información sólida.

En un estudio reciente publicado en bioRxiv*Preimpresión del servidor Los investigadores evaluaron el efecto de una dosis única de una vacuna candidata de células dendríticas sobre las respuestas inmunitarias contra el síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2).

fondo

Recientemente, la orientación de antígenos a las células dendríticas (DC) se ha desarrollado como una atractiva modalidad de vacuna que mejora la eficacia de la vacuna y permite evitar los antígenos y la dosificación. La orientación de posibles candidatos a vacunas antigénicas contra DC convencionales de tipo 1 (cDC1) expresadas por Clec9A se ha mostrado prometedora en investigaciones preclínicas, lo que ha dado lugar a respuestas inmunitarias humorales y celulares sólidas y sostenidas después de una sola dosis de vacunación. Clec9A, un receptor tipo lectina tipo C, actúa como un receptor de reconocimiento de daño. Se descubrió que apuntar a Clec9A era más efectivo que apuntar a los receptores DC.

sobre estudiar

En este estudio, los investigadores investigaron las respuestas inmunitarias celulares y humorales provocadas por una sola dosis sistémica de una construcción de anticuerpos del dominio de unión al receptor Clec9A-SARS-CoV-2 en ratones.

El equipo determinó que 2 μg del complejo adyuvante poli-I:clec9A-RBD produjeron el título equivalente de anti-RBD más fuerte entre los ratones adultos Balb/c después de una sola dosis. Se realizó un examen longitudinal de la respuesta humoral específica de RBD en ratones inoculados con Clec9A-RBD. Luego, se evaluó la actividad neutralizadora del suero de Clec9A-RBD frente a un grupo de 20 Sarpcovirus, incluidas las variantes preocupantes (COV) del SARS-CoV-2, el SARS-CoV y el CoV animal perteneciente a las cepas de pangolín y murciélago.

Se midieron las células auxiliares foliculares T (TFH) y las células B del centro germinal (GC) de RBD. Luego, el equipo examinó las respuestas de células T específicas de RBD después de una sola dosis de la vacuna Clec9A-RBD. El equipo probó si una dosis única de Clec9A-RBD administrada sistémicamente podría inducir respuestas humorales y celulares específicas de antígeno en el tejido pulmonar.

resultados

Los resultados del estudio muestran que la vacunación con una dosis idéntica de antígeno del auxiliar no dirigido recombinante purificado con poli I:C del SARS-CoV-2 RBD no dio como resultado una respuesta significativa contra la inmunoglobulina (Ig)-G anti-RBD. Por otro lado, los ratones inoculados con Clec9A-RBD aumentaron los títulos de anticuerpos detectables siete días después de la inmunización, lo que destaca la eficacia de esta técnica dirigida.

Los títulos de IgG anti-RBD persistieron hasta 21 meses después de la vacunación, con un perfil de isotipo T-helper 1 (TH1). Además, la citotoxicidad dependiente de células dependiente de anticuerpos (ADCC) y las propiedades neutralizantes, junto con la afinidad de unión de los inmunosueros contra la cepa progenitora de SARS-CoV-2 correspondiente, se mantuvieron constantes durante 21 meses mientras aumentaban gradualmente con el tiempo. Estos resultados indican claramente que los animales inoculados con Clec9A-RBD experimentaron una maduración de afinidad a largo plazo.

La actividad neutralizante contra la mayoría de los COV del SARS-CoV-2 aumentó con el tiempo y se mantuvo durante el período de observación de 21 meses, con la excepción de la variante Omicron del SARS-CoV-2. Curiosamente, la actividad neutralizante observada contra los virus Sarpco clade-1B pertenecientes a especies de pangolines y murciélagos fue detectable en todos los puntos de tiempo evaluados y creció significativamente durante el período de observación de 21 meses. Por otro lado, la actividad neutralizante contra los sarcoidvirus del clade-1A fue baja.

La afinidad de unión de la inmunoglobulina Clec9A-RBD contra los COV del SARS-CoV-2 aumentó con el tiempo y persistió durante 21 meses después de la vacunación. De manera similar, la actividad de ADCC informada contra los COV del SARS-CoV-2 aumentó con el tiempo y permaneció elevada 21 meses después de la vacunación. Además, la actividad ADCC del suero inmunoprecipitado frente a Omicron fue equivalente a la evaluada frente a otros COV.

Las respuestas de células TFH específicas de antígeno se provocaron en el bazo tan pronto como siete días después de la vacunación con Clec9A-RBD y aún eran detectables entre seis y 12 meses después. Estas respuestas fueron reactivas a la mayoría de los compuestos orgánicos volátiles del SARS-CoV-2, como Omicron. Además, aproximadamente dos semanas y siete días después de la inmunización, el equipo detectó células cancerosas en los ganglios linfáticos braquiales y el bazo, respectivamente, que habían sobrevivido incluso después de seis a 12 meses.

Los ratones inmunizados con Clec9A-RBD produjeron más células secretoras de interferón (IFN) cuando los esplenocitos se volvieron a estimular con péptidos RBD. Esto demostró la capacidad superior de dirigirse a Clec9A para estimular las respuestas inmunitarias celulares. La abundancia relativa de células T que expresan IFN-Ɣ e interleucina (IL)-5 en animales inmunizados con Clec9A-RBD mostró respuestas celulares significativas con sesgo Th1 contra el SARS-CoV-2 y la cepa correspondientes, respectivamente.

Se encontraron títulos de IgG anti-RBD con un fuerte perfil de isotipo TH1 en fluidos de lavado broncoalveolar (BAL) recolectados 2 semanas después de la vacunación con Clec9A-RBD. Además, las muestras de BAL mostraron neutralización y actividad ADCC contra la cepa progenitora del SARS-CoV-2. La detección de células B GC específicas de RBD en el pulmón es consistente con la producción de anticuerpos específicos de RBD en este tejido.

Conclusión

Los resultados del estudio mostraron que la orientación del SARS-CoV-2 RBD a los cDC1 dio como resultado respuestas inmunitarias inusualmente fuertes y prolongadas después de una sola dosis de vacunación. Sorprendentemente, el estudio reveló evidencia de la evolución de la convergencia a lo largo del tiempo, lo que resultó en una mayor eficacia y magnitud de la respuesta humoral contra una amplia gama de miembros de la familia Sarpicovirus. La tecnología de orientación Clec9A proporciona una plataforma de vacunas plug-and-play flexible que se puede actualizar rápidamente para combatir las variantes que evolucionan rápidamente y se extienden por todo el mundo. Los investigadores creen que la aplicación humana de este enfoque de vacuna es una vía factible e interesante.

*Nota IMPORTANTE

bioRxiv publica informes científicos preliminares que no son revisados ​​por pares y, por lo tanto, no deben considerarse concluyentes, dirigir la práctica clínica o el comportamiento relacionado con la salud, ni tratarse como información sólida.

*Nota IMPORTANTE: bioRxiv Publica informes científicos preliminares que no han sido revisados ​​por pares y, por lo tanto, no deben considerarse concluyentes, orientar la práctica clínica o el comportamiento relacionado con la salud ni tratarse como información sólida.