¿Encontraste el billete dorado? Se requiere ciclina T1 para reactivar la latencia del VIH-1

Más de 20 años después del descubrimiento de la terapia antirretroviral combinada (TAR), aún no se ha logrado la eliminación completa de la infección por VIH. Si bien la terapia antirretroviral controla la replicación viral, no es una cura. Esto se debe a la latencia del VIH, donde el virus se oculta en un estado inactivo en los genomas de las células huésped de larga vida (como las células T CD4 “de memoria”). Esto permite que el virus eluda la vigilancia inmunológica. Debido a que el TAR actúa sobre el mecanismo de replicación viral, el VIH latente que no se replica activamente puede escapar del TAR. Por lo tanto, curar el VIH requiere la capacidad de eliminar el reservorio latente o silenciar permanentemente el virus en el reservorio (o una combinación de ambos).

Para mejorar nuestra comprensión de lo que requieren los genes del huésped para que surja la latencia del VIH, en un nuevo estudio publicado en VirusInvestigadores del laboratorio Imerman de los Departamentos de Biología Humana y Ciencias Básicas informan que el factor huésped ciclina T1 es necesario para promover la reactivación del VIH en una amplia variedad de condiciones que podrían activarlo.

Terry Haver, autor principal del estudio y estudiante de posgrado en el laboratorio de Imerman, realizó una prueba de VIH-CRISPR para identificar los factores del huésped necesarios para que el VIH salga de la latencia en presencia de reactivadores de latencia de moléculas pequeñas (LRA). La ciclina T1 (CCNT1) fue la de mayor éxito en pantalla. Anteriormente se ha demostrado que la ciclina T1 y la quinasa 9 dependiente de ciclina (CDK9) forman un complejo con el factor de elongación de la transcripción positiva b (P-TEFb) para promover la elongación de la transcripción del VIH. «La ciclina T1 y su papel en el alargamiento de la transcripción viral no es nueva», dijo Haver. «Pero lo que nos llamó la atención fue que la ciclina T1 siempre ha estado implicada como un gen esencial por su papel en la elongación de la transcripción como parte del complejo P-TEFb», añadió. Detener la ciclina T1 demostró que la pérdida de ciclina T1 afectó «la transcripción del gen del VIH mucho más que cualquier otro gen huésped», sin embargo, «detener la ciclina T1 no tuvo efectos perceptibles en la función de la célula huésped», explicó Haver.

Se realizó una prueba de latencia de VIH-CRISPR en células T Jurkat infectadas (J-Lats 10.6 y 5A8) utilizando la biblioteca de genes del factor de dependencia del VIH (HIV-Dep). Aquí está el problema: el ARN guía se ha modificado para incorporarlo a virus recién producidos a partir de células infectadas después del tratamiento con LRA. La idea detrás de esto era que si una célula carecía del gen necesario para la latencia, el VIH no volvería a activarse. Por lo tanto, el ARN guía específico (que se dirige a un gen necesario para la reactivación) no se ensamblará en los viriones recién formados. Al realizar una secuenciación profunda, el equipo pudo identificar secuencias de ARN guía que estaban subrepresentadas en el conjunto de virus liberados. Uno de los mejores resultados vistos en pantalla fue la ciclina T1 (CCNT1). Para validar la prueba, el equipo eliminó CCNT1 en células J-Lats, seguido de un tratamiento con varios LRA. En todos los tratamientos, las células CCNT1 de tipo salvaje (WT) pudieron reactivar el VIH, pero las células CCNT1 KO no lograron reactivar el VIH en presencia de LRA, lo que sugiere que la ciclina T1 es esencial para la reactivación del VIH. Además, la pérdida de CCNT1 no afectó la expresión de CCNT2, un homólogo de CCNT1 que también se une a CDK9 como parte del complejo p-TEFb, lo que sugiere que CCNT1 desempeña un papel único. Además, CCNT1 KO no afectó la proliferación celular en el modelo J-Lat. Los resultados se validaron en células T CD4 primarias (el principal objetivo del VIH en individuos infectados), y la pérdida de CCTN1 no afectó la activación de las células T CD4 primarias.